临床分享关节液样本采集技术

关节液是由内膜下层的有孔毛细血管的超滤作用形成的血浆透析液(因此除去了大蛋白质如纤维蛋白原),再加关节组织分泌物改良而形成的。内膜有两种主要细胞群:A型滑膜细胞(固有组织巨噬细胞衍生的)和B型滑膜细胞(分泌成纤维细胞相关的)。B型细胞分泌关节液成分如胶原、纤连蛋白、透明质酸和润滑素。关节液的黏性是由于含有透明质酸。关节液有两个主要功能:作为营养物质如葡萄糖的运输媒介,有助于关节软骨的营养;通过润滑关节表面,有助于关节的机械功能。关节液的分析有助于关节疾病的诊断。其适应症包括僵硬、虚弱、关节疼痛、发热、四肢和关节的肿胀(图1-1)或关节变形。需要注意的是,关节液分析仅是关节疾病诊断的一部分,需要与其他临床和实验室检查结果相结合,包括培养、血清学检查、X线和其他影像检查。在某些情况下,关节穿刺是禁忌的,如关节上方组织存在蜂窝织炎或皮炎,或动物存在菌血症或患有凝血病。(图1-1关节液渗出引起的关节肿胀)

采样

采样前下面的几个方面值得考虑和准备:

保定

由兽医师的临床判断来决定是否要进行物理保定、镇静或麻醉。

无菌术

因正常关节间隙是无菌的,需进行常规无菌操作。

仪器设备

●剪毛剪,无菌手套,无菌的擦洗液和酒精。●无菌的一次性3mL注射器。●1.5英寸(1英寸=2.54cm)22G针(大型犬)或1英寸25G针(小型犬和猫)。对肘关节、肩关节或髋关节可能需要更长的针。●带磨砂面的显微镜载玻片。●无菌空白管和EDTA管:最好提前标记动物名字和采样的关节。

方法

关节液采样时动物通常侧卧,且有问题的关节朝上。关节弯曲和伸展情况下进行触诊有助于辨别关节腔(图1-2)。为避免对关节软骨的损伤,采样针需缓慢前行。采集到的样本量因关节而异,如膝关节液易采集,而腕关节和跗关节不易采集。肿胀的关节关节液尤其多。为将血液污染减少到最低,在针退出关节腔之前,应放开注射器的活塞。读者应参考合适的骨科教科书来了解对特殊关节采样的详细方法。(图1-2腕关节的采样方法)

样本处理

关节液的采集量会有所不同,因此合理安排检测的优先顺序很重要。样本在注射器中时应记录其容量、颜色和混浊度,当样本置于载玻片时应评估黏稠度。也要注意在采样过程中的任何明显的血液污染。应立即进行直接涂片,风干后进行细胞学检查,包括对细胞结构的评估及有核细胞种类计数。根据剩余的样本量,进一步的检测可能包括有核细胞总数和蛋白浓度(EDTA管或无菌空白管;无菌空白管的样本若因被血液污染或炎症而凝集则不能检测蛋白浓度)以及培养(无菌空白管或培养基中样本)。不管采集到的样本量,应立即进行直接涂片,以便更好地保存细胞形态。玻片在染色之前不应该冷藏。

书籍介绍

本文内容摘自《犬猫细胞学诊断手册》本书综述了各类诊断样本的采集技术以及细胞学结果判读的一般原则,以简明清晰的方式介绍了临床实践中常见的病变及相关疾病。本书非常注重高质量的彩色图片的应用。尽量在图题中描述相应病变,以减少正文中不必要的赘述内容。为提高使用效率,本书将参考文献和推荐读物单独列出,读者可在需要时进一步查阅相关信息。

本书主要适用于有志于提升自己犬猫细胞学诊断相关知识的小动物临床医生以及兽医专业在校学生,同时本书对临床病理住院医生也很有帮助。

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本期摘自

《犬猫细胞学诊断手册》校对

廖老师排版

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